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细胞因子试剂盒测原理及标本要求说明

   细胞因子试剂盒检测原理及标本要求:
  一、检测原理:
  采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、检测样本和生物素化的单克隆抗体,经过孵育,样本中存在目的蛋白与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(S-HRP)。洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。终止液终止反应,在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。颜色反应的深浅与样本中存在目的蛋白浓度成正比。
  二、样本要求:
  1、细胞培养上清(胞外)
  2、体液(血清/血浆、胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液等各种积液)
  3、分泌物(泪液、唾液、乳汁等)
  4、排泄物(尿液、粪便)
  5、细胞裂解物和组织裂解物
  注:均已实验验证,可进行实验。
 
  细胞因子试剂盒操作注意事项:
  1、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
  2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
  3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
  4、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
  5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
  6、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
  7、加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
  8、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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